細菌保存培養基(半固體)

培養基，是指供給微生物、植物或動物（或組織）生長繁殖的，由不同營養物質組合配制而成的營養基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質。培養基既是提供細胞營養和促使細胞增殖的基礎物質，也是細胞生長和繁殖的生存環境。培養基種類很多，根據配制原料的來源可分為自然培養基、合成培養基、半合成培養基；根據物理狀態可分為固體培養基、液體培養基、半固體培養基；根據培養功能可分為基礎培養基、選擇培養基、加富培養基、鑒別培養基等；根據使用范圍可分為細菌培養基、放線菌培養基、酵母菌培養基等。培養基配成后一般需測試并調節pH，還須進行滅菌，通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養基由于富含營養物質，易被污染或變質。配好后不宜久置，現配現用。無血清培養基是在常規培養基中添加多種蛋白質、生長因子等等營養物質來代替動物血清。細菌保存培養基(半固體)

培養基中營養物質濃度合適時微生物才能生長良好，營養物質濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需，濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用，例如高濃度糖類物質、無機鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進微生物的生長，反而起到抑菌或殺菌作用。另外，培養基中各營養物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和（或）代謝產物的形成和積累，其中碳氮比（C/N）的影響較大。嚴格地講，碳氮比指培養基中碳元素與氮元素的物質的量比值，有時也指培養基中還原糖與粗蛋白之比。例如，在利用微生物發酵生產谷氨酸的過程中，培養基碳氮比為4/1時，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少；當培養基碳氮比為3/1時，菌體繁殖受到抑制，谷氨酸產量則大量增加。 YPD肉湯有些細胞需要在低溫下培養，這時需要特殊的培養基。

選擇性培養基是指根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基。其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌，從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養基：葡萄糖5%，尿素0.1%，硫化銨0.1%，磷酸二氫鉀0.25%，磷酸氫二鈉0.05%，七水合硫酸鎂0.1%，七水合硫酸鐵0.01%，酵母膏0.05%，孟加拉紅0.003%，pH4.5。富集好氧自生固氮菌：甘露醇1%，磷酸二氫鉀0.02%，七水合硫酸鎂0.02%，氯化鈉0.02%，二水合硫酸鈣0.01%，碳酸鈣0.5%

鑒別培養基(differential media) 在培養基中加入某一反應底物和指示劑，以區別某些微生物的特性從而鑒別之。又分一般鑒別培養基和選擇性鑒別培養基。只用于區別不同微生物種類的培養基稱為-般鑒別培養基，此類培養基中一般不加抑菌劑而只含指示劑，如克氏雙糖鐵培養基，含有葡萄糖及乳糖，以酚紅作為指示劑，觀察培養基底層與斜面的顏色變化判定細菌對葡萄糖和乳糖的發酵能力，加人檸檬酸鐵銨，培養后觀察是否產生黑色沉著以判定細菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而產生硫化氫；又如伊紅-美藍瓊脂，含有乳糖(反應底物)、伊紅-美藍(指示劑)用以鑒別大腸埃希菌、腸道病原菌和其他雜菌。一般鑒別培養基的特點是在配方中都含有指示劑，并可用于區別不同種類的微生物，有些鑒別培養基也可同時作為細菌的特殊需要用來分離培養某些細菌，如胰酪胨大豆瓊脂和巧克力色血瓊脂。孟德爾-韋伯利法可以計算培養基的可利用能量。

選擇性培養基(selective media) 選擇性培養基含有營養物(增菌劑)和抑菌劑(選擇劑)，標本接種于此類培養基后，由于抑菌劑的選擇性抑制作用，使非目的菌受到不同程度的抑制，更有利于目的菌的增殖或分離。利用選擇性培養基經過一定時間的增菌培養，再接種于選擇性鑒別培養基，可以提高目的菌的陽性檢出率。抑菌劑的種類很多，常用的有孔雀綠、燦爛綠、亞硒酸鈉、去氧膽酸鈉、膽鹽、四硫磺酸鈉等。抑菌劑的加入量要適宜、準確，有的劇毒，有的不耐高熱，配制時須特別注意。生長細胞需要的營養物質包括碳源、氮源、微量元素和維生素等。頂層培養基(Ames試驗)

培養基應適合不同類型細菌的生長，包括需氧菌和厭氧菌。細菌保存培養基(半固體)

還有一些鑒別性培養基，是利用細菌特有的各種酶系統，能分解利用各種特定的糖、醇、氨基酸或其他基質而產酸、產氣、產堿或產生其他可見物質，依此進行細菌的鑒別，例如常用的生化培養基。用于細菌生化特性試驗的培養基特點是在無糖的基礎培養基中加人某種特定的基質，并加人指示劑，細菌在此類培養基中的一系列生化反應結果，均通過指示劑顯示出來。此類培養基為生化反應鑒別培養基。根據用量又可分為常量生化培養基和微量生化培養基。值得注意的是生化試驗培養基的某些成分受高溫、pH等諸多因素的影響，在配制和使用時，應根據實際情況嚴格掌握，防止有效成分被破壞，以保障其使用效果。細菌保存培養基(半固體)

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