徐州貴陽鼠尾膠原

鼠尾膠原：鼠尾膠原是一種天然培養基和一種天然的黏附劑。實驗設備及材料：大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。實驗內容：1、制備鼠尾膠原（兩個同學一組操作）。2、切割小玻片。3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養瓶內。制備鼠尾膠原：1、取大鼠尾巴洗凈，75%酒精浸泡5分鐘；2、手持尾巴，用止血鉗夾住鼠尾的，折斷尾骨后拉出尾腱；3、將尾腱剪斷置于平皿中，生理鹽水浸泡；4、重復步驟2、3，直至尾腱量夠用；5、吸去生理鹽水，將尾腱稱重（0.5-1克）；6、將尾腱置于平皿內剪碎，轉移至三角燒瓶中；7、按每克尾腱50ml的比例，加入0.1%醋酸溶液；8、搖晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期；9、離心，4000轉/分，10-15分鐘；10、吸取上清，分裝成小瓶，4℃保存。結論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁。徐州貴陽鼠尾膠原

鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中，制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2．建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經發現該方法會導致丟失蛋白。3．稀釋一定數量的膠原溶液。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養瓶。在室溫或37度結合數小時或者2-8度過夜。無錫鼠尾膠原哪家便宜4°C沉淀10小時，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上，pH左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液（均需要無菌、預冷）10mg/L酚紅用于pH指示）0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一般不用)，雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結）立即混勻。再加入100ul10PBS10培養液，混勻后立即加到培養器皿中(混勻后pH左右，如果PBS或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說明書中給出了原因：“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型，之前多從牛皮、豬皮、牛腱中提取，但這類膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質，也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型；同時，這種畜牧業大量飼養的動物存在著例如瘋牛病等一些生物性疾病及病毒，如果用此開發醫用產品更加存在著品質的不穩定及潛在的風險及危害。”至此，想必“耗子尾汁”在知識產權界的名聲又亮了一些。膠原的立體結構與一般的球狀蛋白質完全不同，每一條亞基形成一股左手旋轉的螺旋。

除了讓細胞更好貼上去，鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠，這樣可以在培養皿中一定程度上模擬身體內部的生長環境，讓細胞在更真實地條件下進行生長。當然，除了這些，耗子尾汁還能做到很多事情，只需要打開網站——知網，輸入鼠尾膠原蛋白就能看到，例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產品，制作止血海綿敷料等各種用途。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白，老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料。這類「耗子尾汁」通常用來鑒別耗子的基因型，對于轉基因小鼠而言，如果無法通過毛色來分辨動物的基因型，往往會選用經典的PCR法。制備鼠尾膠原：手持尾巴，用止血鉗夾住鼠尾的，折斷尾骨后拉出尾腱。無錫鼠尾膠原產品介紹

一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法，采用酸法與酶法相結合的工藝。徐州貴陽鼠尾膠原

酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對分子質量和濃度檢測鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下，其腱性組織被水解成膠凍狀溶液，從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上，可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(，其生物力學強度極差，一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進行SDS-PAGE，結果顯示：Ⅰ型膠原蛋白原液在相對分子質量130000附近有明顯條帶，另一條帶的相對分子質量大于170000(圖2)。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL。吸取礦化液倒入小培養皿中，將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中。礦化2、6d后，分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進行TEM和電子衍射觀察。徐州貴陽鼠尾膠原