DNA和RNA的鑒別染色:利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA。吖啶橙作為一種熒光染料已被用于染色固定,非固定細胞核酸,或作溶酶體的一種標記。觀察死亡細胞熒光變色性變化以及區別分裂細胞和靜止細胞群體。雖然測定DNA和RNA含量時較難獲得好的重復性結果,但該方法已被許多實驗室普遍采用。RNA是核糖核酸,DNA是脫氧核酸。區別:溶解性:都溶于水而不溶于乙醇,因此,常用乙醇來沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚來沉淀RNA。RNA提取試劑注意事項:間層用乙醇沉淀可回收DNA。寧波鄭州RNA提取試劑
植物RNA提取:植物組織中,富含酚類化合物,或富含多糖,或含有某些尚無法確定的次級代謝產物,或RNase的活性較高。這些物質在細胞裂解后與RNA緊密結合形成難溶復合物或者膠狀沉淀,很難將其去除。所以我們在提取植物組織時,要選取針對植物的試劑盒,試劑盒里的裂解液能有效解決多酚易氧化、多糖化合物與核酸分離等難題。1、植物的果皮、果肉、種子、葉片等要在研缽中充分研磨,研磨過程中液氮要及時補充,避免樣品融化,研磨后的樣品應迅速加入裂解液中震蕩混勻,避免RNA降解。2、像水稻及小麥葉片等富含纖維的樣本,則應適當減少提取用量,否則組織研磨及裂解不徹底,會使提取的RNA產量較低。3、含水分較多的植物組織例如石榴果實、西瓜果實、桃子果實等則應當適當提高樣本量(可選100~200mg)。4、植物組織,如植物葉片、根莖、堅硬的果實等材料一般建議使用液氮在研缽中徹底研缽成份,再繼續進行提取步驟。常規的組織勻漿機對植物組織的勻漿效果可能不佳,一般不建議使用。昆明RNA提取試劑生產廠家血漿/血清RNA提取試劑盒:高效去除植物組織中的色素、酚類等雜質,提取RNA的純度高,產量大。
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑,內含異硫氰酸胍等物質,能迅速裂解細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機相。RNA存在于水相中。水相轉移后,RNA通過異丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質。
新型土壤總RNA快速提取試劑盒:獨特裂解劑/裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞內核酸酶,然后RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于玻璃奶,然后將粗純化的玻璃奶轉移到離心柱,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。試劑盒特點:離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩定的弊端。兼容性強,適用于各種不同的土壤、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。快速,簡捷,單個樣品操作一般可在1小時內完成。多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達1.9以上,可直接用于PCR,Northern-blot和各種酶切反應~血漿/血清RNA提取試劑盒:30~40分鐘內即可完成提取過程,提取的總RNA純度高。
RNA提取試劑的選擇:選擇合適的提取試劑是較重要的一步。好的提取試劑在確保成功的同時,操作方便且經濟實用。對于動物組織、簡單的植物材料、各種微生物、培養細胞的totalRNA提取,Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,進一步豐富了TakaraRNA提取的產品線。該產品采用了獨特的細胞裂解系統,無需苯酚氯仿抽提等步驟,簡單快捷。組織或細胞裂解后,提取操作光需20分鐘便可完成~RNA提取試劑:能夠作RNA印跡分析、斑點雜交、poly(A)+選擇。深圳RNA提取試劑進貨價
RNA提取試劑注意事項:耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶。寧波鄭州RNA提取試劑
提取RNA的詳細步驟:首先,將研缽晾干夠,倒入1/3體積的液氮,加入0.2g均質的植物材料,充分研磨后轉入一個含有300微升GMT的1.5ml的離心管中,搖勻。然后,加入30微升2mol/lNaAc進行搖勻,加入300微升酸酚搖勻,加入100微升的氯仿搖勻。然后,在四攝氏度12000r/min下離心二十分鐘,吸取上清液的3/4,加入等體積的異丙醇,于冰上放置十五分鐘。然后,在四攝氏度12000r/min下離心十分鐘,將沉淀懸浮于含100微升的4mol/lLiCl小試管中,于-20攝氏度下放置過夜。然后,在4攝氏度13000r/min下離心10-15min,將沉淀溶于0.4mlDEPC處理水中,加入1/2體積氯仿和1/2體積酸酚,搖勻,進行抽提,在4攝氏度13000r/min下離心五分鐘。將上清液中加入等體積的氯仿搖勻,進行抽提,在四攝氏度13000r/min下離心五分鐘,上清液中加入1/10體積3mol/lNaAc和兩倍體積的午睡乙醇與-20攝氏度放置一小時。寧波鄭州RNA提取試劑