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來源: 發布時間:2023-04-12

外泌體相關蛋白質與肺病的診斷:近年來,高通量質譜分析被普遍地應用于篩選NSCLC外泌體蛋白的研究,這為我們揭示了更多具有生物標志物價值的分子。Birgitte等采用微陣列芯片技術研究了431例肺病患者和150例對照者血漿外泌體中的蛋白表達情況,發現CD151、CD171和TSPAN8這三種蛋白表達不光能區分一些病癥與正常組織,同時也能區分各種肺病的組織亞型。此外,聯合應用這三種蛋白診斷NSCLC的AUC達到0.74。Clark等采用納升液聯用技術(nano-ESI-LC-MS/MS)分析了來自正常支氣管上皮細胞系和兩個攜帶NSCLC細胞系的外泌體的蛋白表達譜,從中篩選出如細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子、溶酶體膜糖蛋白2等多種存在顯著性差異表達的蛋白,同時檢測分析這些蛋白有助于提高NSCLC診斷的敏感性和特異性。由于國內有關外泌體提取試劑的缺乏,我國對外泌體的研究還基本依賴于過程繁瑣的超速離心和進口提取試劑盒。外泌體提取:用這種聚合物沉淀具有許多優點,包括對分離的外泌體影響小、pH中性等。唐山正規外泌體提取試劑廠家批發價

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外泌體研究思路。外泌體研究通常與高通量測序的聯系緊密,研究思路可以分為三大類:表達譜、分子標志物和分子機制方向,其中表達譜思路的特點就是短平快、通常以測序數據為主要內容,短平快發表3-5分文章。而分子標志物的特點是在表達譜基礎之上加入大量樣本驗證,建立ROC、KM曲線,分析分子與臨床疾病的相關性為主,通常文章影響因子在3-10分之間。分子機制研究,顧名思義要做到細胞功能、機制研究深度,因此工作量通常較大,影響因子通常能夠上10+。唐山正規外泌體提取試劑產品介紹在體內參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程,與多種疾病的發生和進程密切相關。深圳正規外泌體提取試劑廠家直銷用于外泌體提取的體液收集注意事項:抽血時間。

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當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時,外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合,進而啟動靶細胞細胞內的信號通路。二是在細胞外基質中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結合,從而啟動細胞內的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質、mRNA以及microRNA。人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體,包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。

所有培養的細胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,參與細胞間通訊,對外泌體的研究興趣日益增長,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創診斷的開發。1983年,外泌體初次于綿羊網織紅細胞中被發現,1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標。

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用于外泌體提取的體液收集注意事項:1、選擇血清還是血漿?推薦大多數研究選擇血漿。血液凝固過程中血小板會產生大量外泌體,含量占血清中外泌體的50%以上,選擇血漿可避免不必要的影響。2、注意抗凝劑的選擇。肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關,這可能是因為肝素與引物和/或酶有競爭作用。除了克制PCR,肝素可以與外泌體結合,阻止細胞攝取外泌體。因此需要記錄肝素類藥物的患者的血液樣本。EDTA和雙嘧達莫(CTAD),CTAD可以阻止血小板的并克制其釋放外泌體。EDTA可能會干擾PCR反應(盡管其程度小于肝素),但是還是優于其他選擇。此外,有研究表明鈣螯合劑可在體外促進外泌體與血小板的結合從而降低經EDTA、或檸檬酸鹽處理后的血液樣本中外泌體的表觀數量。使用肝素時這種影響就不會發生,因此建議在測量外泌體的精確數量時選用肝素。但是也有研究表明肝素可以導致體外條件下外泌體的減少。總之,目前尚需要更多的研究論證抗凝劑是否及如何對外泌體的釋放,作用和下游反應產生特異性影響。直接把外泌體從尿液中沉降下來,無須分離培養人尿液來源細胞并收集培養基。蕪湖正規外泌體提取試劑價格

多聚物沉淀法早先應用于從血清等樣本中收集病毒,現在也被用來沉淀外泌體。唐山正規外泌體提取試劑廠家批發價

大量關于一些病癥相關巨噬細胞的研究表明,一些病癥相關巨噬細胞通過與一些病癥細胞進行細胞間通訊,與一些病癥進展和轉移相關,然而對TAM與一些病癥細胞之間通信的研究限制于可溶性因子,例如促炎細胞因子,其中包括趨化因子、炎癥因子和生長因子等。較近的研究證據表明,外泌體是一些病癥微環境中不同細胞類型之間的重要通訊媒介。外泌體將信息從一個細胞傳遞到另一個細胞并重編程受體細胞。目前大部分研究都集中在一些病癥細胞分泌的外泌體,關于TAM衍生的外泌體及其對治病細胞的影響知之甚少。TAM具有兩種相反的表型:M1亞型巨噬細胞具有抗一些病癥作用,M2型巨噬細胞具有致瘤作用活性。TAM的表型由特定的一些病癥來源的趨化因子和外泌體調節。較近的一項研究表明,一些病癥來源的外泌體miRNA調節一些病癥促進M2巨噬細胞的極化。然而,TAM衍生的外泌體對一些病癥進展和轉移的調節尚未明確定義。目前,TAM的外泌體概況仍然大部分未知,并且TAM衍生的外泌體對于一些病癥進展在功能上是否必需還未確定。唐山正規外泌體提取試劑廠家批發價

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