鼠尾膠原是一種天然培養基,它具有促進體外培養細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用,同時它也是一種天然的黏附劑,當我們需要在培養瓶或培養皿內放置小玻片,制備細胞爬片時,可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養瓶之中。通過本實驗可掌握鼠尾膠原的制...
鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條...
鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加,一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來自大鼠的尾巴,制作過程需要經歷醋酸抽提、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟,才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白。這種膠原蛋白在37℃的條件下會形成3股螺旋結構,可以用來當作細胞培養的基質。細胞...
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說明書中給出了原因:“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,之前多從牛皮、豬皮、牛腱中提取,但這類膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質,也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型;同時,這種畜牧業大量飼養的動物存在著...
鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:不含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/...
功能:當外泌體在1980年初次被發現后,其被認為是細胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質構成及運輸、細胞間信號的傳導以及在體液中的分布的研究發現外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、...
除了讓細胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,這樣可以在培養皿中一定程度上模擬身體內部的生長環境,讓細胞在更真實地條件下進行生長。當然,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,只需要打開網站——知網,輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺...
外泌體(exosomes,Exos)是細胞分泌的一種膜囊泡,因其可以將供體細胞的信息通過其攜帶的蛋白質、mRNA、miRNA等傳遞到受體細胞,實現細胞之間的信息交流及物質交換,并且可以作為藥物載體轉運藥物而引起科學家的普遍關注(Fig1)。外泌體作為內源性的天...
RNA提取真正需要注意的要點:你的植物組織樣本采樣、保存正常嗎?組織裂解充分了嗎?組織起始量是否過大?起始量過大的話,他們得帶進去多少RNase呀,導致裂解液不能充分壓制內源性的RNase,失敗就在預料之中!你的細胞活性好嗎?細胞都到衰亡期了,你提什么RNA呀...
鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加,一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來自大鼠的尾巴,制作過程需要經歷醋酸抽提、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟,才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白。這種膠原蛋白在37℃的條件下會形成3股螺旋結構,可以用來當作細胞培養的基質。細胞...
酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對分子質量和濃度檢測鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,其生物力學強度極差,一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進行SDS-...
鼠尾Ⅰ型膠原:選擇適當的骨修復材料是治好骨缺損的中心環節。目前,臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植。其中,人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無機礦物材料[1-2],由于不含自體骨組織中的有機大分子Ⅰ型膠原蛋白,其臨床療效遠遠低于...
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了...
鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.將黏稠的膠體溶液進行高速冷凍離心處理,收集上清液;在冰水浴中,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀2.用0.03...
含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準備好懸浮于培養液的細胞,并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于Na...
與DNA不同,RNA一般為單鏈長分子,不形成雙螺旋結構,但是很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結構乃至三級結構來行使生物學功能。RNA的堿基配對規則基本和DNA相同,不過除了A-U、G-C配對外,G-U也可以配對。在細胞中,根據結構功能的不同,RN...
外泌體:該研究主要是做了牡蠣基因組測序,并揭示其應激適應和殼結構的復雜性。其中涉及,所鑒定的259種殼蛋白中的84%不是經典分泌蛋白;它們可能是細胞的一部分或被外泌體沉積而來。259個殼蛋白中的61個與外泌體數據庫中的蛋白質匹配,支持了外泌體的存在。在礦化前緣...
外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發的外泌體快速提取試劑盒,組分經過優化處理,適用于細胞培養上清液、血清、血漿、尿液及其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取...
膠原蛋白的提取方法:酸法提取:酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用酸法提取的膠原較...
膠原蛋白的提取方法:1.堿法提取:堿法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等。如Holzer等[5]采用1%~1.5%石灰水浸泡的方法提取膠原蛋白。由于它容易造成肽鍵水解,因此得到的水解產物分子量比較低。所以,若想保留膠原的三股螺旋結構,此法不可取...
膠原蛋白的應用:1.膠原天然的緊密的纖維結構,使膠原材料顯示出很強的韌性和強度,適用于薄膜材料的制備;2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨特之處是:在熱處理過程中.隨著水分和油脂的蒸發和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒被...
ScRNA存在于細胞質中,與蛋白質結合成復合體后發揮生物學功能。ScRNA-seq技術應用普遍,于2017年就有科學家利用scRNA繪制出首張小腸細胞圖譜,這不僅增強了我們對腸道細胞產生物體和其他信號的理解,還為腸道如何對不同入侵病原菌做出應答提供了新的線索。...
細胞凍存和復蘇操作步驟:細胞凍存和復蘇采取“慢凍快融”的原則,慢速冷凍可使細胞內的水份滲出細胞外,減少細胞內形成冰晶的機會,快融以保證細胞外結晶快速融化,避免慢速融化水份滲入細胞內,再次形成胞內冰晶造成對細胞的損傷。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養器皿,培養一些在普通細胞培養器皿中不易貼壁的細胞。也可用于制備三維膠,模擬真實的生長環境,使細胞在三維環境中生長。1,在使用鼠膠原蛋白型包被...
無血清細胞凍存液與含血清細胞凍存液對比:傳統的細胞凍存液是使用培養基、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,統稱為含血清細胞凍存液。含血清細胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,...
RNA提取試劑的選擇:首先,要確定材料的可用性。盡管現有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,但提取的材料仍需謹慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關鍵,但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時,使用Takara公司的樣品保護劑Sample...
除了讓細胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,這樣可以在培養皿中一定程度上模擬身體內部的生長環境,讓細胞在更真實地條件下進行生長。當然,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,只需要打開網站——知網,輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺...
無血清細胞凍存液使用方法:選擇凍存處于對數生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。1)按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2)按照培養細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3)取相當于所需細胞...
外泌體(Exosomes)是細胞分泌到胞外的一種囊泡(ExtracellularVesicles,EVs),其大小為30-150nm,具有雙層膜結構和茶托狀形態,含有豐富的內含物(包括核酸、蛋白和脂質等),參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養上清以及...