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在細胞培養過程中，經常少不了HEPES緩沖液。那么，HEPES緩沖液的配制和使用方法怎樣呢?HEPES緩沖液是一種弱勢，在開放式的培養條件中，若加入HEPES，可防止培養基內pH氧化升高，從而將PH維持在7.0左右。HEPES分子量為238.31，化學名：4-羥乙基哌嗪乙磺酸，分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物緩沖劑，pH值緩沖范圍：6.8-8.2，用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。對細胞無毒性作用。它是一種氫離子緩沖劑，能較長時間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L。關于HEPES緩沖溶液的配制，不同的文獻資料有不同的說法。根據用途，一種是單純的HEPES+NaOH，另一種是HEPES+鹽。GMP條件下生產AVT穩定供貨注射級HEPES。山東輔料HEPES現貨供應

外源基因導入真核細胞的方法有很多種，如磷酸鈣轉染法、DEAE-葡聚糖轉染法、脂質體法、電穿孔法、顯微注射法等。2×HEPES緩沖鹽溶液主要用于磷酸鈣轉染，其主要成分為HEPES，HEPES是一種非離子兩性緩沖劑，能有效控制pH在范圍，尤其在pH具有較好的緩沖能力，終濃度一般為mmol/L，培養液內含mmol/LHEPES 即可達到較好的緩沖能力。Leagene HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細胞轉染溶液，主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成，其**適pH值為，經過濾除菌處理。影響磷酸鈣轉染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA 在細胞上停留的時間、休克時間。Leagene 2xHeBS要求DNA濃度在為宜，Hela、BALB等細胞沉淀放置，CHO、DUKX、BⅡ等細胞可以通過甘油、DMSO進行熱休克處理以提高轉染效率。山東輔料HEPES現貨供應GMP條件下生產注射級HEPES。

儲存方法：HEPES緩沖液在2-8℃下可保存1年。注意事項：HEPES緩沖液運輸時需要加冰袋。但儲存時避免冷凍，否則會有鹽類物質析出。N-三(羥甲基)甲基甘氨酸Tricine，CAS是5704-04-1，是一種兩性離子緩沖液，名字由Tris和glycine衍生而來，結構類似于Tris，但是高濃度具有比Tris更弱的抑制性，也是“Good”緩沖液之一，**初開發用于提供葉綠體反應的緩沖體系。Tricine的有效pH緩沖范圍為7.4-8.8，pKa=8.1（25℃），常用做電泳緩沖液，以及用來重懸細胞沉淀。Tricine具有低負電荷和高離子強度的特性，非常適用于電泳分離1~100kDa的低分子量蛋白?；谖灮鹣x熒光素酶的ATP分析實驗中，比較10種常見的緩沖液，Tricine（25mM）表現出比較好的檢測效果。另外，在自由基誘導的膜損傷實驗中，Tricine還是一種有效的羥自由基清除劑。作者：泰安格林化工鏈接：

（5）緩沖溶液在穩定性方面各顯利弊：①Tris-HCl緩沖溶液pH值受外界影響較大，一般現用現配。同時需要注意Tris是一級脂肪胺，分子結構中的氨基易與醛類化合物發生縮合反應，是一些生化實驗的抑制劑。②硼酸鹽緩沖液有一定毒性，不宜用做注射液或者口服液的緩沖液。③雖然磷酸鹽緩沖溶液穩定性很好，但磷酸根具有一定的絡合能力會抑制一些與金屬離子有關的生化反應。④HEPES緩沖溶液是較理想的生物緩沖劑，但其有多種生物學效應，如：縮短血液凝固時間、減緩平滑肌收縮頻率以及阻斷細胞膜上的陰離子通道等，在一定程度上會影響患者身體狀態，使用時應需注意。國內艾偉拓注射用HEPES已登記。

2021年全球HEPES緩沖液市場銷售額達到了億美元，預計2028年將達到億美元，年復合增長率（CAGR）為%（2022-2028）。地區層面來看，中國市場在過去幾年變化較快，2021年市場規模為百萬美元，約占全球的%，預計2028年將達到百萬美元，屆時全球占比將達到%。消費層面來說，目前地區是全球比較大的消費市場，2021年占有%的市場份額，之后是和，分別占有%和%。預計未來幾年，地區增長**快，2022-2028期間CAGR大約為%。生產端來看，和是比較大的兩個生產地區，2021年分別占有%和%的市場份額，預計未來幾年，地區將保持**快增速，預計2028年份額將達到%。注射級，低內***、國產化穩定供應、高性價比注射級HEPES找AVT！山東高純HEPES使用注意事項

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(1)hepes緩沖液可按所需的濃度直接加入到配制的培養液中,再過濾除菌.每1000ml培養液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調pH至7.2,濾過除菌后使用.此時HEPES的使用濃度為10mmol/L.(2)亦可配成100x貯存液（lmol/L），使用前取99ml培養液加入lml貯存液，**終應用濃度仍為10mmol/L。lmol/L（100x）hepes緩沖液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶（2ml/瓶）,4℃或-20℃保存.作者：知乎用戶0mmkBe山東輔料HEPES現貨供應

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