英瀚斯生物為您整理免疫組化實驗步驟
1、石蠟切片置于65℃烘箱中烘片2h,脫蠟至水,用PBS沖洗三次,每次5min。
2、切片置于EDTA緩沖液中微波修復,中火至沸后斷電,間隔10min低火至沸。
3、自然冷卻后PBS洗3次,每次5min。4、切片放入3%過氧化氫溶液,室溫下孵育10min,以阻斷內源性過氧化物酶。
5、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封閉20min(封閉電荷)。
6、去除BSA液,每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織,4℃過夜。
7、PBS洗3次,每次5min。
8、去除PBS液,每張切片加50μl-100μl相應種屬的二抗,4℃孵育50min。
9、PBS洗3次,每次5min。
10、去除PBS液,每張切片加50-100μl新鮮配制DAB溶液,顯微鏡控制顯色。
11、顯色完全后,蒸餾水或自來水沖洗,蘇木素復染,1%鹽酸酒精分化(1s),自來水沖洗,氨水返藍,流水沖洗。
12、切片經過梯度酒精(70-100%)10min一個梯度,脫水干燥,二甲苯透明,中性樹膠封固。 動物、細胞的免疫組化、免疫熒光,就找英瀚斯生物!內蒙古小鼠免疫組化哪家好
免疫組化的實驗步驟
免疫組化的實驗步驟通常包括組織固定、切片、抗原修復、封閉、一抗孵育、二抗孵育、顯色和復染等。首先,組織樣本需要經過固定(如福爾馬林固定)以保持其形態結構。然后,將固定后的組織包埋在石蠟中并切成薄片??乖迯褪菫榱吮┞侗还潭ㄟ^程掩蓋的抗原表位,常用的方法有熱修復和酶消化。封閉步驟是為了減少非特異性結合,通常使用血清或BSA。一抗孵育是關鍵步驟,一抗與目標蛋白特異性結合。二抗孵育則是通過二抗與一抗結合,并連接顯色系統。,通過顯色和復染使目標蛋白可視化。 內蒙古小鼠免疫組化哪家好南京有靠譜的能做免疫組化的公司嗎?
細胞爬片免疫組化檢測實驗步驟
1、選擇貼壁良好的細胞爬片,用4%多聚甲醛固定后15min后自然晾干。
2、PBS洗3次,每次5min。3、切片放入3%過氧化氫溶液,室溫下孵育10min,以阻斷內源性過氧化物酶。
4、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封閉20min(封閉電荷)。
5、去除BSA液,每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織,4℃過夜。
6、PBS洗3次,每次5min。
英瀚斯生物,細胞、動物、臨床樣本免疫組化檢測都可完成!
7、去除PBS液,每張切片加50μl-100μl相應種屬的二抗,4℃孵育50min。
8、PBS洗3次,每次5min。
9、去除PBS液,每張切片加50-100μl新鮮配制DAB溶液,顯微鏡控制顯色。
10、顯色完全后,蒸餾水或自來水沖洗,蘇木素復染,1%鹽酸酒精分化(1s),自來水沖洗,氨水返藍,流水沖洗。
11、切片經過梯度酒精(70-100%)10min一個梯度,脫水干燥,二甲苯透明,中性樹膠封固。
細胞屬性的判定,免疫組化也可以進行這方面的臨床應用。通過特定抗體標記出細胞內相應的抗原成分,來判定細胞的屬性,確定cancer的來源。如細胞角蛋白(CK)是上皮性標記,CK陽性提示cancer為上皮源性cancer;降鈣素抗體是甲狀腺髓樣cancer特有的標記;甲狀腺球蛋白(Tg)陽性提示是甲狀腺濾泡性cancer;前列腺特異性抗原(PSA)只見于前列腺上皮;膠質纖維酸性蛋白(GFAP)陽性則提示膠質cancer;CD20和CD79a陽性則提示B細胞淋巴瘤;平滑肌肌動蛋白(Actin)陽性提示cancer為平滑肌源性;胃腸道間質瘤中原cancer基因蛋白產物CD117陽性;血管源性cancer中內皮細胞標記物CD34陽性等等。如果您需要做實驗外包,可以與我們英瀚斯生物進行聯系。免疫組化IHC詳細介紹!
免疫組化中IHC vs ICC的區別。英瀚斯生物為您說明。除了生物學來源,IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化,要么通過固定過程,要么是單獨的透化步驟,這樣抗體才能與細胞內的靶點相結合。而IHC可能不要單獨的透化步驟,這取決于切片的厚度和固定方法。包埋在石蠟中的IHC切片必須進一步處理,才能進行抗體染色。一旦處理好樣品,IHC和ICC的染色操作就幾乎沒什么差異了。當然,就染色而言,根據所使用的抗體來優化還是少不了的。免疫組化結果怎么看?內蒙古小鼠免疫組化哪家好
免疫組化結果分析是什么?內蒙古小鼠免疫組化哪家好
免疫組化的未來發展方向隨著技術的進步,免疫組化在未來將朝著更高靈敏度、更高通量和更自動化的方向發展。高靈敏度技術(如信號放大系統)將能夠檢測更低豐度的目標蛋白。高通量技術(如組織芯片)將能夠同時檢測多個樣本或多個目標蛋白。自動化技術(如自動染色儀)將能夠提高實驗的標準化和重復性。此外,免疫組化還將與其他技術(如質譜分析、單細胞測序)結合,提供更***的蛋白質表達和功能信息。這些技術的發展將推動免疫組化在生物醫學研究和臨床診斷中的應用。本回答由 AI 生成,只供參考,不構成任何專業建內蒙古小鼠免疫組化哪家好